1)启动子活性检测:
转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异顺序结合,这些特异性的序列被称为顺式因子。转录因子的DNA结合域和顺式因子实现相互结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。
技术流程


启动子与转录因子相互作用检测工作原理
2)miRNA与3’UTR相互作用检测:
利用荧光素酶报告系统体外验证miRNA潜在靶基因。miRNAs 与靶基因的3' UTR区域特异结合后调节靶基因的表达。当3' UTR靶标序列融合在一个荧光素酶报告基因下游并在体外表达时,miRNA通过与下游3' UTR特异结合从而调节荧光素酶的表达。最后,通过分析荧光素酶的活性,间接了解miRNA的靶标调控作用和特异性。

客户提供
1.启动子活性分析:基因名称及ID;
2.转录调控:转录因子名称及ID、靶基因名称及ID;
3.miRNA靶基因验证:miRNA名称、物种信息、靶基因名称及ID;
结题报告:
启动子活性分析:
① 报告基因载体;
② 转录因子表达载体;
③ 结题报告(引物设计、载体测序文件、酶活检测);
miRNA靶基因验证:
① miRNA靶基因结合位点;
② 报告基因野生型载体、突变型载体;
③ 结题报告(引物设计、载体测序文件、酶活检测)。