实验步骤

载体构建的基本实验步骤包括：

1、目的DNA片段，靶点设计和载体的获取；

2、载体构建；

3、连接产物的转化；

4、克隆筛选。

5、测序验证及结果交付

技术服务内容

1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、病毒表达载体、哺乳动物表达载体、报告基因载体等；

2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；

3、载体元件替换和改造；

4、过表达、CRISPR/Cas9、shRNA、siRNA载体和miRNA表达载体构建；

5、过表达载体构建。

客户提供信息

1、模板的完整序列，包括目的DNA序列和载体序列，酶切位点、模板质粒、目的质粒的名称、抗性等信息；

2、定点突变的具体要求，以及突变后的目的序列；

3、建议客户提供含有目的基因的质粒作为模板；

交付内容

1、约1ug质粒DNA冻干粉

2、1支含有重组质粒的穿刺菌

3、结题报告