细胞永生化（Cell immortalization）是指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离，从而具有增殖能力的过程。正常组织来源的细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长，但经过有限次数的传代后，就会停止增殖，发生衰老和死亡。而细胞培养是一项基本的科研技术，无论是基础的科学研究，还是在临床治疗，以及生物工程制药，疫苗研发等方面，都发挥着重要的作用。
利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内，从而建立永生化细胞株，以达到使体外培养的细胞具有增殖能力且细胞间无差异的目的。对细胞永生化进行深入研究，不仅有利于我们了解细胞增殖与衰老的分子机制，而且为探寻肿瘤治疗及器官移植的研究奠定了坚实的基础。此外，由于永生化细胞具有可以多次传代的特性，可以利用各种细胞永生化的方法使那些传代困难、增殖缓慢、容易衰老的细胞获得永生，从而为研究人员提供更多的细胞资源，为科学研究提供了良好的体外细胞模型。
永生化实验步骤：
预实验 | 慢病毒感染客户提供的原代细胞，根据感染效率判断是否继续永生化实验 | 1周 |
永生化试剂选择 | 根据原代细胞查文献或根据经验选择相应的永生化试剂，并包装相应的永生化病毒试剂 | 3-4周 |
永生化株系构建
| 原代细胞培养及永生化试剂感染原代细胞，原代细胞诱导培养至10带左右，检测细胞永生化状态；
选择细胞状态好的细胞，继续培养至30代左右，qPCR检测永生化基因表达，提供结题报告，根据客户需求提供活细胞或冻存细胞 |
2-3个月 |
永生化试剂种类：
hTERT、SV40 T Antigen、EBV genes、HPV E6-E7、HOXB8, HOXA9, HOXA10、Adenoviral E1A-E1B、p53 siRNA, Rb siRNA、Bmi1、CDK4、Myc T58A (c-Myc)、Ras V12 (H-Ras)
案例分析：
