产品介绍:
细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应,制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度,可通过分级分离法获得,即先低速除去细胞核以及细胞碎片,再进行高速梯度离心分离线粒体。 对线粒体进行分离、研究。
本产品可以快速分离组织中的线粒体,分离线粒体的同时可以获得去除细胞浆蛋白,用于分析细胞色素 C 等线粒体蛋白向胞浆的释放,获得的大部分线粒体都具有完整的内膜和外膜和生理功能(如检测线粒体膜电位),获得的蛋白可用于 SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。
存储条件:
-20℃,1年,避免反复冻融
产品优势:
• 快速便捷—只需40-50min分离完整线粒体;• 完整性好—获取的线粒体完整性较好,80%具有完成膜结构;• 活性保障—分离出来的线粒体生物活性,生理功能都很好;• 操作简便—在微量离心管中进行分离;• 兼容性好—分离出的线粒体可用去污剂裂解或加以处理用于几乎任何下游应用(包括 2D 电泳)
案例分析:
注意事项:
1、 试剂(如 PMSF)对于不同实验不必全部使用,在实验条件成熟后可以不必使用。
2、 如果不是用于制备线粒体蛋白,裂解液不必加入 PMSF;如果用于制备线粒体蛋白样品, 裂解液需添加 PMSF;PMSF 一定要在试剂加入到样品中前 1~2min 内加入,以免 PMSF 在水溶液中很快失效。
3、 分离线粒体的所有步骤均需在冰上或 4℃进行,所用溶液需冰浴或 4℃预冷,全部操作 时间尽量控制在 1h 以内。
4、 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取 1000g 和 12000g,如果希望纯度更高,但对 线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可用 2000g 和 6000g。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、仅用于科研领域,不可用于临床诊断及其他用途。