LysoView Blue 是一种溶酶体蓝色荧光探针，是荧光素 pH 指示探针，可以用来区分酸性细胞器，实现对溶酶体的特异性标记，从而将动态研究活细胞内溶酶体生物合成和功能成为可能。LysoView 在酸性细胞器内富集，可导致其质子化，而质子化可以减轻染料分子侧链上的弱碱性，以减少荧光淬灭，使产生的荧光信号强度增大。因此，LysoView 表现出 pH 依赖性，在酸性条件下，荧光信号强度增加。LysoView Blue 可以单独或组合使用，检测酸化的溶酶体和细胞内溶酶体的功能改变。例如，某些肿瘤细胞的溶酶体具有较低的 pH 值，而有些肿瘤细胞则相反。此外，一些细胞的细胞器酸化缺陷表现为囊性纤维化合其他病症。LysoView Blue 荧光探针在此类应用上具有非常广泛的意义。

产品参数：

激发/发射波长：370/425nm

运输条件：常温

储存条件：20℃，避光

分子式：C24H28N2O2

分子量：376.50

实验操作：

细胞制备与染色

注意：①打开产品包装前，请先将产品预热至室温，将装有产品的小管短暂离心，使融有染料的 DMSO 溶液沉积于管底。②LysoView Blue 的最佳工作浓度取决于不同的实验需求，本实验操作步骤说明仅提供一些初始条件作为参考。具体的染色浓度需要根据细胞类型、产品对细胞和组织的通透性等因素作相应调整。

1 用培养基或 PBS 将 1 mg/mL 的 LysoView Blue 原液稀释，建议终浓度至少为 1µM。为了降低由染色液过量导致的假阳性，应该尽量使用较低的工作浓度。

注意：如果细胞染色后用不含染色液的培养基孵育，会出现荧光信号衰减和细胞起泡的现象。

2 对于贴壁细胞，在干净的培养皿内用盖玻片让细胞爬片至合适的细胞密度，弃去培养液，加入适量预热至 37°C 的染色液，根据不同类型的细胞在合适的条件下孵育30 分钟~2 小时。弃去染色液，加入新鲜的培养基，使用荧光显微镜选择合适的滤光片镜检染色结果。如果细胞染色不充分，建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的时间。

3 对于悬浮细胞，离心细胞，弃去上清液；缓慢加入预热至 37℃的染色液，根据细胞类型选择合适条件让细胞与染色液孵育 30 分钟~2 小时；离心细胞，用预热的新鲜培养基重悬细胞；用荧光显微镜选择合适的滤光片镜检染色结果。如果细胞染色不充分，建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的时间。亦可以用 BD Cell-Tak（BDBiosciences）处理悬浮细胞，让细胞吸附于盖玻片上，然后按贴壁细胞的方法染色（见步骤 1.2）

案例分析：

注意事项：

荧光染料不可避免的存在淬灭问题，请存放操作时注意避光，以减缓荧光的淬灭。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。