活体成像技术（optical in vivo imaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于荧光素酶能催化底物化学发光的原理，将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射入体内的底物发生反应，利用光学系统检测光强度，间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域，最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立，并可用于病毒学研究、siRNA 研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。

D-Luciferin 是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。在ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素能够被氧化，并且在 560nm 检测到其化学发光。Luciferin 由 luc 基因编码，该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性，luc 基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外,荧光素/荧光素酶被用来测量 10^-15摩尔量的 ATP

产品参数：

外观：可溶于水的浅黄色固体

λ Ex/λ Em = 328/533 nm 贮存条件：-20℃ 干燥避光保存

保质期：有效期见外包装

CAS号：115144-35-9

分子式：C11H7N2O3S2 K

分子量：318.42

产品应用：

1）体外化学发光分析（in vitro）；

2）活体成像实验（in vivo）；

3）高灵敏度 ATP 分析；

实验原理：

实验操作：

体外生物发光检测

1）用 314 µL 蒸馏水溶解 10 mg D-荧光素钾盐，配制成 100 mM 的储存液（200×）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。

2）用细胞培养基 1∶200 稀释储存液，配置工作液(终浓度150 μg/mL)，即 1×D-荧光素钾盐。

3）去除培养细胞的培养基。

4）向细胞内添加适量 1×荧光素工作液，然后进行图像分析。（或者细胞放在 37℃短时间孵育后检测可增强信号）

活体成像分析检测

1）用无菌的 1×PBS 配制 D-荧光素钾盐工作液(15 mg/mL)，即向 10 mg D-荧光素钾盐中，加入 667 µL 1×PBS，0.2 µm 滤膜过滤除菌。使用时，需保持冰冷且避光。

2）参照下表，根据不同的注射方式，注射不同的体积：

3）注射入体内 5-10 分钟后，进行成像分析。

案例分析：

注意事项：

D-Luciferin , Potassium Salt 样品的背景荧光主要来源于荧光素，如果不立即使用本产品，建议分装后， -20℃避光保存。