DRAQ5是一种远红外荧光活细胞 DNA 染料，是一种对双链 DNA 具有高亲和力的蒽醌染料。亲脂性的荧光探针，可以自由透过活细胞（组织）和固定细胞（组织）的细胞膜及核膜，从而达到快速标记 DNA 的目的。同时，DRAQ5 也是水溶性的，可直接使用，无需细胞裂解和洗涤步骤，使用简便，可满足自动化需求。由于 DNA 染色是量化的，因此 DRAQ5 可应用于细胞增殖研究中的 DNA 含量分析。由于其远红外的激发和发射光谱特性，DRAQ5可与其它多种荧光探针联合使用，是细胞表达绿色荧光蛋白（GFP）融合蛋白的理想选择。该探针与现今市面上众多的仪器平台兼容。

细胞水平的荧光检测方法，如流式细胞术、in-cell ELISA（ICE）、荧光显微镜以及高内涵成像技术需要荧光标记来识别单个细胞。当使用多个荧光探针来观察细胞靶点及活动时，每个探针必须具有不同于其他探针的荧光光谱。DNA 结合性蓝色荧光探针，例如 Hoechst 和 DAPI 是最常用到的细胞核荧光探针；但当缺乏 UV 照射仪或同时使用其他蓝色光谱荧光探针时，这类探针却不能使用。因此，不同于这些蓝色光谱的细胞核探针对于细胞鉴别、计数，以及确定核形态及 DNA 含量等应用领域是具有重要意义的。

产品信息:

分子式：C22H28N4O4

分子量：412.49

CAS 号：254098-36-7

激发波长范围：647/680nm

实验步骤:

注意：由于不需要洗涤的步骤，因此 DRAQ5 的染色通常在其它染色实验完成后进行。另外，在检测培养基中加入 DRAQ5，即可用于活细胞的检测。

1. 制备磷酸盐缓冲液（PBS，不含叠氮化钠），或为特定细胞准备的特殊培养基。

2. 对于悬浮细胞，用 PBS 或培养基重悬细胞，注意细胞密度不超过 4×105 cells/ml。

注意：对于贴壁细胞，根据细胞融合度估算细胞密度；对于组织切片，根据切片尺寸估计细胞数。

3. 用 PBS（或培养基）按 1:1000 的比例稀释 DRAQ5，直接滴加到组织切片或细胞中。

4. 轻轻混匀使染液分布均匀，室温避光孵育 5-30 分钟（具体时间根据不同的细胞类型进调整）。如需在 37℃环境孵育，需将孵育时间缩短至 1-3 分钟，因为在 37 摄氏度时 DRAQ5 染色的进度会明显加快。

注意：因荧光容易淬灭，需要在避光环境中孵育。

5. 无需洗涤或进一步处理即可直接观察。

案例分析：

DRAQ5 (red) counterstaining of fixed U2OS cells. AlexaFluor 488 antibody to β-tubulin (green).

注意事项:

避免反复冻融，建议适当分装。

使用前请先高速离心数秒，使液体充分沉降到管底。

存放及操作时尽量注意避光，以减缓荧光的淬灭。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

由于激发波长范围很宽，不建议与其他可被 488/633 nm 激光激发的远红光荧光染料联用。